核心原则：严控杂质、严防盐析、规范冲洗、保护色谱柱、减少气泡与磨损；含缓冲盐的流路，必须 “先水洗盐，再有机相保存”适用：反相 C18 为主，兼顾正相、自动进样、紫外检测器，适合实验室 SOP、技术交底。

一、环境与流动相管理（源头防控）

环境条件：室温 18～25℃，湿度 40%～60%；远离振动、热源、强电磁；通风良好，废液桶及时清空，有机溶剂密闭存放

流动相硬性要求

溶剂用色谱纯，水为 18.2MΩ・cm 超纯水；全部流动相经0.22μm 滤膜过滤，超声脱气（在线脱气机可简化超声）

缓冲盐现配现用，容易长菌、析晶；水相流动相不隔夜长期存放

更换溶剂必须保证互溶；不互溶溶剂（如水→正己烷）要用异丙醇做过渡溶剂，避免分层、堵柱

样品：样品进样前 0.22μm 滤膜过滤，复杂基质建议使用保护柱（预柱），拦截颗粒、杂质，保护分析柱

二、标准开关机与冲洗流程（每日必做）

✅ 含缓冲盐流程（重点！最容易踩坑） 实验结束 → 10% 甲醇水（高水相），0.8～1.0 mL/min 冲洗≥30 min，彻底洗去管路、色谱柱、流通池内盐分 → 换纯甲醇 / 乙腈冲洗 20 min → 停泵、关灯、关机 ✅ 无盐流动相 结束后直接用纯甲醇 / 乙腈冲洗 20 min，平衡保存 

✅ 开机：开机自检 → purge 排气泡 → 平衡流动相，基线、压力稳定再进样；不要直接上样 

✅ 长期停机（＞7 天）：流路充满甲醇 / 乙腈；色谱柱拆下两端密封保存，仪器断电；定期复冲，防止水相长菌、固定相干涸

三、各核心部件专项维护

1. 高压输液泵

吸滤头（入口滤头）：每周检查，堵塞、发黄时，异丙醇超声清洗；严重污染直接更换

柱塞杆、密封圈：密封圈属于易损件，一般3～6 个月更换；漏液、压力大幅波动优先排查密封圈；开启柱塞杆清洗液循环（5% 甲醇水）

单向阀：压力不稳、抽液困难时拆下，异丙醇超声清洗，注意安装方向不能颠倒

禁止空泵干跑，缓慢升降流速，避免压力骤变冲击填料

2. 色谱柱（最贵耗材）

常规硅胶基质 C18：pH 控制 2～8，避免强酸碱长时间运行；流速逐步调节，严禁压力猛升猛降

保存：反相柱存甲醇 / 乙腈；正相柱存正己烷 / 异丙醇；柱身标注保存溶剂、方向；常规色谱柱不要反向冲洗（厂家注明可反冲除外）

轻拿轻放，避免摔落、剧烈震动；梯度方法结束后充分平衡，防止残留强保留物质累积

3. 自动 / 手动进样器

自动进样器：洗针液定期更换；每周执行洗针、清洗样品环；检查针尖有无毛刺、弯折，磨损及时更换；针座是高频污染点，定期清洗，防止交叉污染、鬼峰

手动进样阀：每次进样后用溶剂充分清洗定量环；转子密封垫磨损会漏液、峰形异常，按需更换；转动阀动作干脆，不要缓慢卡顿

4. 紫外检测器（UV）

氘灯寿命约2000 h，建立灯时长台账；能量下降、基线噪声明显变大及时更换；不检测时提前关灯，延长寿命

流通池：含盐体系容易结晶污染；定期甲醇 - 水冲洗；严禁强酸强碱长时间浸泡流通池；观察有无气泡附着（气泡会造成基线跳动）

四、周期性维护清单（参考，以仪器说明书为准）

每日：检查压力、基线、漏液、流动相液位、废液；按规范冲洗流路，填写使用记录

每周：清洗吸滤头；更换洗针液、密封清洗液；进样系统强溶剂清洗

每月：检查单向阀、柱塞杆；流通池清洗；核查氘灯使用时长；在线脱气腔维护

每季度 / 半年：更换泵密封圈；评估色谱柱柱效；管路检漏、紧固接头